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[一]保留時(shí)間變化

　　1.柱溫變化 柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱

　　2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱

　　3.緩沖液容量不夠 用25mmol/L的緩沖液

　　4.柱污染 每天沖洗柱

　　5.柱內(nèi)條件變化 穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相

　　6.柱快達(dá)到壽命 采用保護(hù)柱

　　[二]保留時(shí)間縮短

　　1.流速增加 檢查泵,重新設(shè)定流速

　　2.樣品超載 降低樣品量

　　3.鍵合相流失 流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

　　4.流動(dòng)相組成變化 防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀

　　5.溫度增加 柱恒溫

　　[三]保留時(shí)間延長(zhǎng)

　　1.流速下降 管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡

　　2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化 用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱

　　3.鍵合相流失 同前[二]3

　　4.流動(dòng)相組成變化 同前[二]4

　　5.溫度降低 同前[二]5

　　[四] 出現(xiàn)肩峰或分*

　　1.樣品體積過大 用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%

　　2.樣品溶劑過強(qiáng) 采用較弱的樣品溶劑

　　3.柱塌陷或形成短路通道 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件

　　4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品

　　5.進(jìn)樣器損壞 更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子

　　[五]鬼峰

　　1.進(jìn)樣閥殘余峰 每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗

　　2.樣品中未知物 處理樣品

　　3.柱未平衡 重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑 [尤其是離子對(duì)色譜]

　　4.三fu乙酸[TFA]氧化[肽譜] 每天新配,用抗氧化劑

　　5.水污染[反相] 通過變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級(jí)的水

　　[六] 基線噪聲

　　1.氣泡[尖銳峰] 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

　　2.污染[隨機(jī)噪聲] 清洗柱,凈化樣品,用HPLC級(jí)試劑

　　3.檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲 更換氘燈

　　4.電干擾[偶然噪聲] 采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來(lái)源[如水浴等]

　　5.檢測(cè)器中有氣泡 流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

　　[七]峰拖尾

　　1.柱超載 降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相

　　2.峰干擾 清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相

　　3.硅羥基作用 加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品

　　4.同前[四]4 同前[四]4

　　5.同前[四]3 5.同前[四]3

　　6.死體積或柱外體積過大 連接點(diǎn)降至zui低,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管

　　7.柱效下降 用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱

　　[八]峰展寬

　　1.進(jìn)樣體積過大 同[四]1

　　2.在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展 進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散

　　3.數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢 設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)

　　4.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過大 設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%

　　5.流動(dòng)相粘度過高 增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相

　　6.檢測(cè)池體積過大 用小體積池,卸下熱交換器

　　7.保留時(shí)間過長(zhǎng) 等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫

　　8.柱外體積過大 將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至zui小

　　9.樣品過載 進(jìn)小濃度小體積樣品